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CNW柱新品速遞——雞蛋和雞肉基質(zhì)中金剛烷胺、利巴韋林的檢測

更新時(shí)間:2020-06-19      點(diǎn)擊次數(shù):2550

利巴韋林金剛烷胺均屬于抗病du藥物,在人類流感類疾病防治領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。我國農(nóng)業(yè)部560號公告明確規(guī)定抗病du藥物為禁用獸藥,但市場上非法添加的現(xiàn)象仍然存在,而一次性高效檢測這2種物質(zhì)卻是一大難點(diǎn)。

安譜實(shí)驗(yàn)精心研究推出金剛烷胺/利巴韋林柱,可以同時(shí)分析檢測利巴韋林和金剛烷胺兩種目標(biāo)物。通過一次實(shí)驗(yàn),分步洗脫的方式,分別收集得到兩種目標(biāo)物。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證回收率和穩(wěn)定性優(yōu)異,而且流速適中,大大節(jié)省前處理時(shí)間,提高效率,降低檢測成本。


1前處理
 

前處理方法

      稱取雞肉、雞蛋基質(zhì)樣品2g,置15mL離心管中,加入內(nèi)標(biāo)混合溶液,再加入 5mL 0.25mol/L 乙酸銨溶液(pH=4.8) 和 40μL 100pm 酸性磷酸酶溶液,渦旋 30s,37° C 恒溫避光酶解 2h。在酶解液中加入 4mL 2% 三氯yi酸(pH=4.8)溶液,渦旋 30s,10000 r/min,離心 10min,移取上清液于另一離心管中,用 50% 氨水調(diào) pH 至 8.5±0.1,加水定容至 10mL,再次離心,得到上層澄清提取液。取 5mL 提取液待上樣


 

活化平衡

      5mL 乙腈、3mL 0.5% 甲酸水、3mL 0.25M 乙酸銨 (pH=8.5)


 

上樣

      5mL 待上樣液


 

淋洗1

      3mL 0.25M 乙酸銨 (pH=8.5)、3mL 水,抽干


 

洗脫1

      2mL 0.5% 甲酸水,收集洗脫液,漩渦混勻后過濾膜,待 LC/MC/MC 檢測(利巴韋林)


 

淋洗2

      3mL 甲醇,抽干


 

洗脫2

      5mL 5% 氨化甲醇(含 10% 異丙醇),收集洗脫液(金剛烷胺)


 

濃縮

      45 ° C水浴中氮吹近干,加 1mL 0.5% 甲酸水(含 10% 甲醇)定容,混合后,過濾膜,待 LC/MC/MC 檢測

 



2色譜條件

      儀器:ACQUITY UPLC 超高效液相色譜儀,串聯(lián) AB 5500 型三重四極桿質(zhì)譜儀,配電噴霧離子源 (ESI)

 

洗脫程序:

 

目標(biāo)物離子對:

 



3實(shí)驗(yàn)譜圖

 

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圖1 利巴韋林標(biāo)準(zhǔn)曲線

 

微信圖片_20200619095249.jpg

圖2 金剛烷胺標(biāo)準(zhǔn)曲線


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圖3 標(biāo)準(zhǔn)品中利巴韋林峰(245.1/113.1)

 

微信圖片_20200619095255.png

圖4 標(biāo)準(zhǔn)品中 13C5-利巴韋林峰(250.1/113.1)


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圖5 雞肉基質(zhì)加標(biāo)過 SBEQ-CA6535 利巴韋林峰

 

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圖6 雞蛋基質(zhì)加標(biāo)過 SBEQ-CA6535 利巴韋林峰


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圖7 標(biāo)準(zhǔn)品中金剛烷胺峰(152.2/135)

微信圖片_20200619095308.png

圖8 標(biāo)準(zhǔn)品中 D15- 金剛烷胺峰(167.2/150.1)

 

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圖9 雞肉基質(zhì)加標(biāo)過 SBEQ-CA6535 金剛烷胺峰

 

微信圖片_20200619095314.png

圖10 雞蛋基質(zhì)加標(biāo)過 SBEQ-CA6535 金剛烷胺峰

 

 



4實(shí)驗(yàn)結(jié)果

利巴韋林加標(biāo)回收率

 

金剛烷胺加標(biāo)回收率

 

結(jié)果討論: 安譜實(shí)驗(yàn)開發(fā)的柱基質(zhì)適用性良好,實(shí)驗(yàn)回收率在 78%~112%,RSD 小于 10%,產(chǎn)品性能與進(jìn)口品牌相當(dāng),且流速更快大大節(jié)省時(shí)間。

 



5推薦耗材

 

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